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蛇毒质量的检测与鉴别

蛇毒质量的检测主要是区别同种蛇毒的优劣,其鉴别是区分不同种类的蛇毒及其真伪。掌握蛇毒的测定及鉴别是对蛇毒研究的最基本要求,每种蛇都有其特定性质,我们可以根据此关系来区分不同蛇种的蛇毒。一般根据某种标准蛇毒测定的标准数据为依据,来判定某种蛇毒质世的优劣。常用的一般标准如下:

A.毒性强度

一般毒性测定分为急堆、亚急性和慢性毒性三种。蛇毒的毒性强库只需要测定急性毒性,用来表示其杀伤力、中赛反应力。毒性强度大,杀伤力就强;反之就小。一般用小白鼠半数致死量来表示,’也有用小白鼠全致死赶LD1100表示的,能够使95 — 100%小白鼠死亡的毋为全致死盘。其测定方法为选用某种给毒途径(皮下、腹腔、静脉注射X按每公斤体重给毒量计筇,注入体内后,在一定时间内可引起半数动物死亡的剂齿称为LD100。其数值通过统计学公式处理所得,判定毒性强弱看LD50值的大小。數值小,毒性强;数值越大,毒性越小。

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关于蛇萄毒興度的实验数据各地报道很多,并且差异也颇大。实验数据受多种因素的影响,如地区差别、.同种蛇不同产地的毒性强度可能不一样;蛇毒的处理情况、采毒季节、饲养条件、保存时伺长短、保存方法等均可影响毒性,但是上表基本可以反映出不同蛇种蛇毒的强度。银环蛇毒力最强,五步蛇毒最弱。给药途径不同,LD50的值也不一样。其顺序为:腹腔给毒最小,静脉次之,肌肉更次,皮下最大。

B.蛇毒的质量测定

测定蛇毒的质量,目的是检验蛇毒的种类、合格程度。一般常检测以下数项:性状、气味、色泽、含水跫、蛋白质总含世、不溶物质、光谱密度〈吸收最大峰值〕、毒性强度等。为了检定何种蛇毒可采用免疫扩散、测定其特殊成分等。

a.蛇毒处理检査由于各种蛇毒的化学成分各不相同,因此干燥后的蛇毒各有所不同,一般干燥彻底的蛇毒松脆易碎无硬块,重世轻,呈细颗粒或粉末状,有一定挥发刺激性气味。五步蛇毒、蝰蛇毒呈白色、银环蛇毒呈灰白色,竹叶青蛇毒呈浅黄色,蝮蛇毒、眼镜蛇毒呈浅黄到黄色,眼镜王蛇毒、金环蛇毒、烙铁头蛇毒为金黄色。如干燥不彻底或混有杂质较多,就会有色泽的改变,并且颗粒较粗大,表面发亮不易碎,溶解慢或不彻底,往往粘附于试管壁上。主要原因是抽气时间短,负压不足,表面干燥较好,而内部千燥较差。

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b.含水世测定用清洁千燥的称世瓶篮于105 1烘箱内5〜10分钟,用坩锅钳将称量瓶取出,放入干燥器内冷却并称重,加上样品500毫克(被测定的蛇毒)放于105摄氏度烘箱内2小时后再称蛇毒重量,烘干后的蛇毒要立即加盖,整个操作过程不得用手直接去拿。

c.溶解度测定主要检查不溶物质的含世,不溶物质含世越少越好,一般不应超过0.08 %。

d.蛋白质测定蛇毒主要为多种蛋白质和多肽的琨合物。其中还含有少世的脂质、鱗脂和单糖、无机盐钟、納、锌等。但蛋白质及多肽的总含世占85〜90%。蛋白质含抵的测定多采用紫外分光光度计测定,蛇毒蛋白吸收最大峰值在279283纳米之间。

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e.电泳或柱层析不同种类蛇毒具有不同的蛋白质成分,因此表现电泳带及柱层析各组分含世也不一致,是区别不同类蛇毒的主要方法。

f.免疫电泳扩散法把电泳技术同免疫扩散给合起来,用已知的抗体(某种抗蛇毒血清)来检测未知的抗原(蛇赛如同一蛇种蛇毒,可在相接部产生明显的沉淀线反应,用来区别不同种类蛇毒。


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